(Vloeisitometrie, FCM) is 'n selontleder wat die fluoressensie-intensiteit van gekleurde selmerkers meet. Dit is 'n hoë-tegnologie tegnologie wat ontwikkel is gebaseer op die ontleding en sortering van enkelselle. Dit kan vinnig die grootte, interne struktuur, DNA, RNA, proteïene, antigene en ander fisiese of chemiese eienskappe van selle meet en klassifiseer, en kan gebaseer word op die versameling van hierdie klassifikasies.
Vloeisitometer bestaan hoofsaaklik uit die volgende vyf dele:
1 Vloeikamer en vloeistofstelsel
2 Laserligbron en straalvormingstelsel
3 Optiese stelsel
4 Elektronika, berging, vertoon en analise stelsel
5 Sel sorteer stelsel
Onder hulle is laseropwekking in die laserligbron en straalvormingstelsel die hoofmeting van fluoressensieseine in vloeisitometrie. Die intensiteit van die opwekkingslig en die blootstellingstyd hou verband met die intensiteit van die fluoressensiesein. Laser is 'n samehangende ligbron wat enkelgolflengte, hoë intensiteit en hoë stabiliteit verligting kan verskaf. Dit is die ideale opwekkingsligbron om aan hierdie vereistes te voldoen.
Daar is twee silindriese lense tussen die laserbron en die vloeikamer. Hierdie lense fokus 'n laserstraal met 'n sirkelvormige deursnee wat uit die laserbron uitgestraal word in 'n elliptiese straal met 'n kleiner deursnee (22 μm × 66 μm). Die laserenergie binne hierdie elliptiese straal word volgens 'n normale verspreiding versprei, wat konsekwente beligtingsintensiteit verseker vir selle wat deur die laseropsporingsarea gaan. Aan die ander kant bestaan die optiese stelsel uit veelvuldige stelle lense, speldegate en filters, wat rofweg in twee groepe verdeel kan word: stroomop en stroomaf van die vloeikamer.
Die optiese stelsel voor die vloeikamer bestaan uit 'n lens en speldgat. Die hooffunksie van die lens en speldgat (gewoonlik twee lense en 'n speldgat) is om die laserstraal met 'n sirkelvormige deursnee wat deur die laserbron uitgestraal word, te fokus in 'n elliptiese straal met 'n kleiner deursnee. Dit versprei die laserenergie volgens 'n normale verspreiding, wat konsekwente beligtingsintensiteit vir selle oor die laseropsporingsarea verseker en interferensie van verdwaalde lig tot die minimum beperk.
Daar is drie hooftipes filters:
1: Langdeurlaatfilter (LPF) - laat slegs lig met golflengtes hoër as 'n spesifieke waarde deur.
2: Kortdeurlaatfilter (SPF) - laat slegs lig met golflengtes onder 'n spesifieke waarde deur.
3: Banddeurlaatfilter (BPF) - laat slegs lig in 'n spesifieke golflengtereeks deur.
Verskillende kombinasies van filters kan fluoressensieseine op verskillende golflengtes na individuele fotovermenigvuldigerbuise (PMT'e) rig. Byvoorbeeld, filters vir die opsporing van groen fluoressensie (FITC) voor PMT is LPF550 en BPF525. Die filters wat gebruik word om oranje-rooi fluoressensie (PE) voor die PMT op te spoor, is LPF600 en BPF575. Die filters vir die opsporing van rooi fluoressensie (CY5) voor die PMT is LPF650 en BPF675.
Vloeisitometrie word hoofsaaklik vir selsortering gebruik. Met die vooruitgang van rekenaartegnologie, die ontwikkeling van immunologie en die uitvinding van monoklonale teenliggaampietegnologie, word die toepassings daarvan in biologie, medisyne, aptekerswese en ander velde al hoe meer wydverspreid. Hierdie toepassings sluit in seldinamika-analise, sel-apoptose, seltipering, tumordiagnose, geneesmiddeldoeltreffendheidanalise, ens.
Postyd: 21 September 2023
