(Vloeisitometrie, VCM) is 'n selanaliseerder wat die fluoresensie-intensiteit van gekleurde selmerkers meet. Dit is 'n hoëtegnologie-tegnologie wat ontwikkel is gebaseer op die analise en sortering van enkelselle. Dit kan vinnig die grootte, interne struktuur, DNS, RNS, proteïene, antigene en ander fisiese of chemiese eienskappe van selle meet en klassifiseer, en kan gebaseer wees op die versameling van hierdie klassifikasies.
Die vloeisitometer bestaan hoofsaaklik uit die volgende vyf dele:
1 Vloeikamer en fluidika-stelsel
2 Laserligbron en straalvormingstelsel
3 Optiese stelsel
4 Elektronika, berging, vertoon en ontledingstelsel
5 Selsorteringstelsel
Onder hulle is laser-opwekking in die laserligbron en straalvormingstelsel die hoofmeting van fluoresensieseine in vloeisitometrie. Die intensiteit van die opwekkingslig en die blootstellingstyd hou verband met die intensiteit van die fluoresensiesein. Laser is 'n koherente ligbron wat enkelgolflengte-, hoë-intensiteit- en hoë-stabiliteitsbeligting kan verskaf. Dit is die ideale opwekkingsligbron om aan hierdie vereistes te voldoen.
Daar is twee silindriese lense tussen die laserbron en die vloeikamer. Hierdie lense fokus 'n laserstraal met 'n sirkelvormige dwarssnit wat deur die laserbron uitgestraal word, in 'n elliptiese straal met 'n kleiner dwarssnit (22 μm × 66 μm). Die laserenergie binne hierdie elliptiese straal word volgens 'n normale verspreiding versprei, wat 'n konsekwente beligtingsintensiteit vir selle wat deur die laserdeteksiearea beweeg, verseker. Aan die ander kant bestaan die optiese stelsel uit verskeie stelle lense, gaatjies en filters, wat rofweg in twee groepe verdeel kan word: stroomop en stroomaf van die vloeikamer.
Die optiese stelsel voor die vloeikamer bestaan uit 'n lens en 'n gaatjie. Die hooffunksie van die lens en gaatjie (gewoonlik twee lense en 'n gaatjie) is om die laserstraal met 'n sirkelvormige dwarssnit wat deur die laserbron uitgestraal word, te fokus in 'n elliptiese straal met 'n kleiner dwarssnit. Dit versprei die laserenergie volgens 'n normale verspreiding, wat 'n konsekwente beligtingsintensiteit vir selle oor die laserdeteksiearea verseker en interferensie van verdwaalde lig tot die minimum beperk.
Daar is drie hooftipes filters:
1: Langdeurlaatfilter (LPF) - laat slegs lig met golflengtes hoër as 'n spesifieke waarde deur.
2: Kortdeurlaatfilter (SPF) - laat slegs lig met golflengtes onder 'n spesifieke waarde deur.
3: Banddeurlaatfilter (BPF) - laat slegs lig in 'n spesifieke golflengtebereik deur.
Verskillende kombinasies van filters kan fluoresensieseine teen verskillende golflengtes na individuele fotomultiplierbuise (PMT's) rig. Byvoorbeeld, filters vir die opsporing van groen fluoresensie (FITC) voor PMT is LPF550 en BPF525. Die filters wat gebruik word om oranje-rooi fluoresensie (PE) voor die PMT op te spoor, is LPF600 en BPF575. Die filters vir die opsporing van rooi fluoresensie (CY5) voor die PMT is LPF650 en BPF675.
Vloeisitometrie word hoofsaaklik vir selsortering gebruik. Met die vooruitgang van rekenaartegnologie, die ontwikkeling van immunologie en die uitvinding van monoklonale teenliggaamtegnologie, word die toepassings daarvan in biologie, medisyne, apteek en ander velde toenemend wydverspreid. Hierdie toepassings sluit in seldinamika-analise, sel-apoptose, seltipering, tumordiagnose, geneesmiddeldoeltreffendheidsanalise, ens.
Plasingstyd: 21 September 2023
