(Vloei -sitometrie, FCM) is 'n selanaliseerder wat die fluorescentie -intensiteit van gekleurde selmerkers meet. Dit is 'n hoë-tegnologie-tegnologie wat ontwikkel is op grond van die ontleding en sortering van enkelselle. Dit kan die grootte, interne struktuur, DNA, RNA, proteïene, antigene en ander fisiese of chemiese eienskappe van selle vinnig meet en klassifiseer, en dit kan gebaseer wees op die versameling van hierdie klassifikasies.
Vloei -sitometer bestaan hoofsaaklik uit die volgende vyf dele:
1 vloeikamer en vloeistofstelsel
2 Laserligbron en balkvormingstelsel
3 Optiese stelsel
4 elektronika, berging, vertoon- en analise -stelsel
5 sel sorteerstelsel
Onder hulle is laser -opwinding in die laserligbron en balkvormingstelsel die belangrikste meting van fluorescentie -seine in vloeisitometrie. Die intensiteit van die opwekkingslig en die blootstellingstyd hou verband met die intensiteit van die fluorescentie -sein. Laser is 'n samehangende ligbron wat enkelgolflengte, hoë-intensiteit en hoë stabiliteitsverligting kan bied. Dit is die ideale ligbron vir opwindingsligte om aan hierdie vereistes te voldoen.
Daar is twee silindriese lense tussen die laserbron en die vloeikamer. Hierdie lense fokus 'n laserstraal met 'n sirkelvormige dwarssnit wat vanaf die laserbron vrygestel word in 'n elliptiese balk met 'n kleiner dwarssnit (22 μm × 66 μm). Die laserenergie binne hierdie elliptiese balk word volgens 'n normale verdeling versprei, wat die konsekwente beligtingsintensiteit verseker vir selle wat deur die laseropsporingsarea beweeg. Aan die ander kant bestaan die optiese stelsel uit verskeie stelle lense, pinholes en filters, wat grofweg in twee groepe verdeel kan word: stroomop en stroomaf van die vloeikamer.
Die optiese stelsel voor die vloeikamer bestaan uit 'n lens en pinhole. Die hooffunksie van die lens en pinhole (gewoonlik twee lense en 'n pinhole) is om die laserstraal te fokus met 'n sirkelvormige dwarssnit wat deur die laserbron in 'n elliptiese balk met 'n kleiner dwarssnit vrygestel word. Dit versprei die laserenergie volgens 'n normale verdeling, wat die konsekwente verligtingintensiteit vir selle oor die laseropsporingsarea verseker en die interferensie van verdwaalde lig tot die minimum beperk.
Daar is drie hooftipes filters:
1: Langpasfilter (LPF) - Laat slegs lig met golflengtes hoër as 'n spesifieke waarde deur.
2: Kortdeurlaatfilter (SPF) - Laat slegs lig met golflengtes onder 'n spesifieke waarde deur.
3: Bandpass -filter (BPF) - laat slegs lig in 'n spesifieke golflengte -reeks deur.
Verskillende kombinasies van filters kan fluorescentie -seine op verskillende golflengtes na individuele fotomultiplierbuise (PMT's) rig. Byvoorbeeld, filters vir die opsporing van groen fluoressensie (FITC) voor PMT is LPF550 en BPF525. Die filters wat gebruik word om oranje-rooi fluorescentie (PE) voor die PMT op te spoor, is LPF600 en BPF575. Die filters vir die opsporing van rooi fluoressensie (CY5) voor die PMT is LPF650 en BPF675.
Vloei -sitometrie word hoofsaaklik gebruik vir selsortering. Met die bevordering van rekenaartegnologie, die ontwikkeling van immunologie en die uitvinding van monoklonale teenliggaamtegnologie, word die toepassings daarvan in biologie, medisyne, apteek en ander velde al hoe meer wydverspreid. Hierdie toepassings sluit in seldinamika -analise, sel apoptose, seltiping, tumordiagnose, medisyne -effektiwiteitsanalise, ens.
Postyd: Sep-21-2023
